JC-1 线粒体膜电位荧光探针1mg
产品名称: JC-1 线粒体膜电位荧光探针1mg
英文名称: JC-1 线粒体膜电位荧光探针
产品编号: 40705ES03
产品价格: 0
产品产地: 翌圣生物
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2024-12-10T13:18:22
使用范围: null
- 联系人 : 李自转
- 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
- 邮编 : 200030
- 所在区域 : 上海
- 电话 : 139****5640 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
- 二维码 : 点击查看
产品信息
产品描述
JC-1 是一种广泛用于检测线粒体膜电△Ψm位的理想荧光探针。JC-1染料以电势依赖性的方式积聚在线粒体内,可以用来检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。正常线粒体内,JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物,聚合物发出强烈的红色荧光(Ex=585 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=514 nm, Em=529 nm)。JC-1不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。观察时,只需使用常规的观察红色荧光和绿色荧光的设置即可。
JC-1 用于检测细胞的线粒体膜电位时常用的浓度范围为 1~20 μg/ml,对于很多细胞适宜采用的 JC-1浓度为 10 μg/ml。
产品性质
使用方法
1)JC-1粉末(5 mg):直接加1 ml DMSO到粉末内,室温颠倒混匀使其充分溶解,即得到5 mg/ml的储存液。溶液分装成小量储存于-20℃,避光干燥,避免反复冻融。
2)JC-1储存液(1mg in DMSO):本品是JC-1的DMSO储存液,浓度为5 mg/ml。使用者需要根据单次用量来分装,-20℃避光干燥,避免反复冻融。
3)工作液配制:将冻存的储存液置于室温充分融化,之后用缓冲液或者预热的培养基直接稀释储存液(5 mg/ml)到需要的工作液浓度,边震荡边稀释,充分混匀。为了去除任何不溶颗粒,建议13,000 x g离心JC-1工作液1 min,小心吸取上清转移到新的管子内。整个过程要避光操作。注意:因JC-1不溶于水,很可能在稀释到工作液的过程中形成聚集颗粒,则建议细胞染色前用离心或者过滤的方法去除这些颗粒后再使用。
2. JC-1染色步骤(流式细胞仪)
1) 于6-,12或24-孔板上进行细胞铺板,密度为5×105 cells/ml。37℃,5%CO2培养箱培养过夜。选择合适的化合物根据特定的步骤进行凋亡诱导。 注:进行凋亡诱导时的细胞密度建议不超过1×106 cells/ml,也可根据自己的细胞类型培养至合适的密度。
2) 取0.5 ml细胞悬液至无菌的离心管内;
3) 室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清。
4) 用0.5 ml JC-1工作液重悬细胞,于37℃,5%CO2培养箱孵育15-30 min;注意:一般情况,15 min足以进行充分的染色。
5) 室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清;
6) 用2 ml细胞培养液或者缓冲液重悬细胞,之后室温条件400 x g离心5 min;吸掉上清;
7) 重复步骤6);
8) 用0.5 ml新鲜培养液或者缓冲液重悬细胞,即可进行后续的流式分析。注意:请马上进行流式定量分析,此细节很重要。
数据分析:含有红色JC-1聚集物的健康细胞线粒体用FL2通道检测;含有绿色JC-1单体的凋亡或不健康细胞用FL1(FITC)通道检测。
3. JC-1染色步骤(荧光显微镜)
A. 悬浮细胞
TUNEology 波长可调检测卡盒-->