产品信息

产品描述

本试剂盒可直接快速地对小鼠组织（如鼠尾、鼠耳、鼠趾等）样本进行PCR扩增，具有极强的样本兼容性。本试剂盒配备了强力的裂解缓冲液，可以快速裂解样品，释放基因组DNA。裂解产物可以直接加入到PCR反应体系中，无需精提纯化，操作方便。此外，本试剂盒对样品投入量要求低，2-5 mm2鼠耳或肝脏、1-5 mm鼠尾、1-2个脚趾均可进行实验。

本试剂盒提供的2× Hieff® Tissue Direct PCR Mix为2倍浓度的热启动PCR反应液，包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分，大大简化操作过程，降低污染几率。

该试剂盒可用于转基因鉴定、小鼠基因分型等。

产品组分

a) Lysis solution为裂解液，请戴手套操作。
b) 2× Hieff^® Tissue Direct PCR Mix：包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、4 mM Mg²⁺、PCR反应增强剂、稳定剂等。

运输方法

干冰运输。

保存方法

 
1. 组分A：2-8℃保存，有效期1年。若长时间多次使用，请分装后储存，避免交叉污染。
2. 组分B/C：-20℃保存，避免反复冻融。有效期1年。

操作方法

样品基因组DNA释放

1. 剪取2-5 mm²鼠耳或肝脏组织，或1-5 mm鼠尾、或1-2个脚趾，置于1.5 mL离心管中；

2. 在上述离心管中加入200 μL Lysis solution和10 μL Proteinase K，轻轻涡旋混匀，使得样品完全被浸润，短暂离心；

3. 在恒温孵育仪中70℃孵育10 min；

4. 孵育完成后，将样品置于95℃或者沸水浴中加热5 min灭活Proteinase K;

5. 将裂解产物涡旋振荡充分混匀后，12000 rpm (13400× g)离心10 min；

6. 将上清转移至新的离心管，-20℃保存不超过48小时或直接取上清用于后续PCR扩增。

【注】：1. 组织应尽量剪碎，以便裂解反应更顺利进行。

2. 70℃孵育，一般10 min即可满足多数PCR需求。若需要的DNA量较大或样品较难裂解，可将时间延长至20-30 min。组织块不需完全裂解，残余的部分在后续离心步骤中可被除去。

PCR反应体系