封闭用 鸡血清(源液)(稀释10-20倍)
产品名称: 封闭用 鸡血清(源液)(稀释10-20倍)
英文名称: chicken serum
产品编号: SL6-10
产品价格: 0
产品产地: 北京/solarbio
品牌商标: Solarbio
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封闭血清说明书
Blocking Serum
规格:10ml
保存:-20℃保存,有效期5年。
产品简介:
封闭血清适用于免疫组化或者免疫荧光实验中样本的封闭。可以封闭待检样本中与蛋白质非特异性结合的位点,另外还可以封闭样品中内源性的Fc片段结合位点,阻断抗体与样品中的Fc受体结合,从而降低背景,减少假阳性。在选择封闭血清时,要注意封闭用血清中不能含有目标蛋白,且与一抗来源不同,可用与二抗相同来源的封闭血清。
使用方法:
使用时,用PBS(0.01mol/L pH7.2-7.4)将正常血清稀释10-20倍,直接滴加在组织切片或者细胞涂片上,37℃度10-30分钟,清除血清,勿洗,滴加适当比例稀释的一抗工作液,37℃孵育1-2h或4℃过夜。
Western Blot一般流程:
1、蛋白样品制备:用于蛋白质免疫印迹的样品为蛋白质的溶解液,可以是纯化后的蛋白质样品,也可以是组织细胞裂解液。
2、蛋白定量:评估电泳上样量或检测蛋白含量大小。先?蛋白定量,western后在依据内参定量。
3、电泳:依据实验目的选择电泳类型,根据被检目的蛋白的分子量选择胶的浓度,制胶,电泳。
4、转膜:将聚丙烯酰胺上的蛋白质转移至薄膜上,常用半干转或湿转。
5、封闭:选择适当封闭剂将膜上的蛋白质结合位点封闭阻断。
6、一抗孵育:一抗与特异性抗原的结合。
7、二抗孵育:二抗与抗原上结合的一抗的再结合过程。
8、底物显色:二抗一般为标记抗体,根据二抗上的标记物来选择化学放光或显色底物等方法进行检测。
9、图片分析:标定Marker,进行分析与扫描 。
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