JC-10 线粒体膜电位荧光探针-细胞生物学检测-试剂-生物在线
翌圣生物科技(上海)股份有限公司
JC-10 线粒体膜电位荧光探针

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

商家询价

产品名称: JC-10 线粒体膜电位荧光探针

英文名称: JC-10 线粒体膜电位荧光探针

产品编号: 40707ES03

产品价格: 0

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T13:16:28

使用范围: null

翌圣生物科技(上海)股份有限公司
  • 联系人 : 李自转
  • 地址 : 上海市浦东新区天雄路166弄一号楼三层南单元
  • 邮编 : 200030
  • 所在区域 : 上海
  • 电话 : 139****5640 点击查看
  • 传真 : 点击查看
  • 邮箱 : lizizhuan@yeasen.com
  • 二维码 : 点击查看


产品信息

产品名称

产品编号

规格

外观

储存

价格(元)

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

40707ES03

1mg (2 mg/ml)

溶液

-20℃避光保存

680.00

JC-10 线粒体膜电位荧光探针

40707ES08

5mg

红色粉末

-20℃避光保存

2763.00

产品描述

线粒体膜电位荧光探针JC-10JC-1的升级产品,同样可用于检测线粒体膜电位的变化。因JC-1虽然在许多实验中被广泛应用,但是其水溶性很差,即使在1 μM浓度的条件下,JC-1也会在水的缓冲液中析出。而JC-10具有更好的水溶性,可以在某些需要高浓度染料的实验中替代JC-1

正常细胞内,JC-10选择性聚集在线粒体基质中形成可逆的红色荧光聚合物(Ex=540 nm, Em=590 nm);不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失,JC-10由多聚体转变为单体形式存在于胞浆中,产生绿色荧光(Ex=490 nm, Em=525nm)。JC-10不仅可用于定性检测,因颜色的变化可以非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。也可以用于定量检测,因线粒体的去极化程度可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。这两种颜色的变化可以用流式细胞仪上的标准滤光器检测到,绿色荧光可用FL1通道分析,红色荧光可用FL2通道分析。除了用于流式细胞术,也可以用于荧光成像和荧光酶标板检测平台。

在一些细胞系中JC-10有着比JC-1更好的表现。不过,JC-10的性能表现极具细胞依赖性特征。

产品性质

化学名称(Chemical name

5,6 -Dichloro-1,1′,3,3′-tetraethyl-imidacarbocyanine iodide; Enhanced JC-1;

分子式(Formula

C25H27Cl2IN4

分子量(Molecular Weight

583.34

纯度(Purity

95%HPLC

外观(Appearance

红色粉末

溶解性(Solubility

溶于DMSO

荧光光谱

Fluorescent spectrum

单体形式(monomer form):Ex=490 nm, Em=525 nm

聚合物形式(J-aggregate form):Ex=540 nm, Em=590 nm

运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。粉末-20干燥避光保存,至少一年有效。储存液分装成单次使用量,-20干燥避光保存,避免反复冻融,约一年有效。

使用方法

1工作液配制:

1JC-10粉末(5 mg):直接加2.5 ml DMSO到粉末内,室温颠倒混匀使其充分溶解,即得到2 mg/ml(约3 mM)的储存液。溶液分装成小量储存于-20,避光干燥,避免反复冻融。

2JC-10储存液(1mg in DMSO):本品是JC-10DMSO储存液,浓度为2 mg/ml(约3 mM。使用者需要根据单次用量来分装,-20避光干燥,避免反复冻融。


3)工作液配制(现配现用):将冻存的储存液置于室温充分融化,之后用HHBS1×Hanks with 20 mM Hepes buffer, pH 7.0)或其他缓冲液(pH 7-8,含0.02% Pluronic® F-127)配制成10-30 μM 1×工作液。涡旋混匀。

注:对于某些细胞,在pH 8情况下可能会阻止JC-10渗透入细胞。

2 JC-1染色步骤(荧光酶标仪)

1)细胞准备

A贴壁细胞:细胞培养过夜使其密度达到2×104~8×104 cells/well/90μl96孔板)或者5×103~2×10cells/well/20μl (384孔板)

B悬浮细胞:离心后重新将细胞悬浮在培养液中1×105~2×105 cells/well/90μl(多聚赖氨酸包被的96孔板)或者2.5×103~5×10cells/well/20μl (多聚赖氨酸包被的384孔板) 实验前800 rpm离心2分钟。注意:不同的细胞系需要根据具体情况优化凋亡实验用的最佳细胞密度。

2)用实验药物(10 μl 10×化合物)处理细胞一段时间以诱导细胞凋亡(例如,用camptothecin处理Jurkat细胞4-6 h)空白对照(只有培养基不含细胞)中加入相同量的药物。 注意:药物处理前没有必要清洗细胞。但是,如果药物对血清敏感,可在加入药物前吸掉培养基和血清因子。然后加入等量体积的HBSS溶液到孔内。或者细胞直接培养在无血清培养基内。

3)加入100 μl/孔(96孔板)或25 μl/孔(384孔板)JC-10工作液。

4375% CO2孵育15-60 min具体孵育时间取决于细胞类型和细胞浓度。每次实验建议优化体系。

5)直接进行荧光变化检测,记录Ex/Em = 500/525 nmFITC通道)和540/595 nmTRITC通道)的荧光值,然后计算红色荧光信号与绿色荧光信号的比值,用来判断细胞健康程度。

(可选)或者,吸除JC-10工作液,加入100μl /孔(96孔板)或25μl/孔(384孔板)HHBS,再进行后续的荧光酶标仪检测。

3 JC-1染色步骤(荧光显微镜或流式细胞仪)

1)养细胞过夜使其在药物处理以诱导凋亡时的密度为:5×105~1×10cells/ml。选择实验药物处理细胞一段时间以诱导细胞凋亡(例如,用camptothecin