Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)-PCR/RT-PCR/qPCR-试剂-生物在线
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Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)

Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)

商家询价

产品名称: Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)

英文名称: Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)

产品编号: 13747ES50

产品价格: 2465.00

产品产地: Yeasen

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2024-12-10T11:18:52

使用范围: null

规格 价格
50 T 2465.0
100 T 2735.0
1000 T 22415.0
10000 T 203975.0
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Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus)是以 RNA 为模板进行多重定量 PCR 反应的试剂盒。在实验的过程中,逆转录和定量 PCR 在同一反应管中进行,简化了实验操作,降低了污染的风险。

本试剂盒利用耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase 高效合成第一链 cDNA,并利用 UNICON® HotStart Taq DNA

Polymerase 进行定量扩增。本试剂盒主要包含优化的 MP Buffer,Enzyme Mix 等,缓冲液中已含有 Mg2+和 dNTP , 有效

抑制非特异性 PCR 扩增的因子和提升多重 qPCR 反应扩增效率的因子,能够在保证引物扩增效率的同时,进行多重扩增反

应。并添加了 dUTP/UDG 系统,可有效防止气溶胶污染的风险。

 

组分信息

组分编号

组分名称

13747ES50

(50 T)

13747ES60

(100 T)

13747ES80

(1000 T)

13747ES92

(10000 T)

13747-A

2×Hifair® V MP Buffer

625 μL

1.25 mL

12.5 mL

125 mL

13747-B

Hifair® V Enzyme Mix

50 μL

100 μL

1 mL

10 mL

【注】1. 2×Hifair® V MP Buffer 为Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer 的简写,其中包含dNTPs, dUTP, Mg2+ , stabilizers和enhancers等。

2. Hifair® V Enzyme Mix 主要包含有耐热 Hifair® V Reverse Transcriptase、UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase 和 UDGase。

 

储存条件

-25~-15℃保存,有效期1年。

 

使用说明

  1. 反应体系(以25 μL为例)

组分

体积(μL

终浓度

2×Hifair® V MP Buffer

12.5

Hifair® V Enzyme Mix

1

-

Primer/Probe Mix (2.5 μM)

3

0.3 μM

模板RNA

1-10

-

RNase Free H2O

to 25

-

【注】使用前务必充分混匀,避免剧烈震荡产生过多气泡。

      1)引物探针混合液浓度Primer/Probe Mix 中包含多对引物和探针,通常每条引物终浓度可以根据情况在0.1-1.0 μM 间进行调整;探针终浓度可以根据对荧光曲线和荧光增峰的要求在 0.05-0.5 μM 范围内进行调整。 

2) 模板稀释:qPCR灵敏度极高,建议将模板进行稀释使用,控制Ct值在20-35之间适宜。

3)体系配制:请于超净工作台内配制,并使用无核酸酶残留的枪头、反应管;推荐使用带滤芯的枪头避免交叉污染和气溶胶污染。

 

  1. 参考扩增程序

1)常规扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

逆转录

50℃a

10 min

1

预变性

95℃

5 min

1

扩增反应

95℃

15 sec

45

60℃b

30 secc

 

  1. 快速扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

逆转录

50℃a

2 min

1

预变性

95℃

2 sec

1

扩增反应

95℃

1 sec

45

60℃b

13 secc

a. 逆转录:42℃或者50℃均可。

b. 扩增反应:扩增反应温度根据设计的引物Tm值进行调整。

c. 荧光信号采集:不同的qPCR检测仪器所需的荧光信号采集时间不同,请根据最短时间限制进行设置。

 

  1. 适用机型

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™,ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 and 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex;

Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™;

Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™;

Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000;

Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96;

Thermo Scientific PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR

 

注意事项

1. 实验过程中请使用RNase free耗材。

2. 为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

Ver.CN20230918