产品信息




    

        

            

            
产品名称
            
            

            
产品编号
            
            

            
规格
            
            

            
储存
            
            

            
价格（元）
            
        
        

            

            
Ready To Use Coelenterazine h 即用型腔肠素h
            
            

            
40907ES10
            
            

            
10 vials
            
            

            
-20℃避光
            
            

            
6856.00
            
        
    




背景描述




腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480 nm。
腔肠素作为水母发光蛋白复合物（Aequorin）的组成成分，只有与钙离子（Ca2+）结合后，才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。其具有以下几个优点：1）能检测较大范围的Ca2+浓度（0.1-100 μM）；2）样品无自体荧光，背景荧光较低，尽管信号较荧光钙离子指示剂弱，但信噪比更高，因此具有较高灵敏度；3）Aequorin能够稳定维持在细胞内，能够进行数小时至数天Ca2+的监测。
腔肠素具有能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET）的特性：在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量转移到EYFP（增强的黄色荧光蛋白），发出绿光（~530 nm）。通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系研究蛋白-蛋白之间的相互作用。BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量。


主要应用




1. 活体成像。
2. 报告基因检测。
3. 检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平：细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚**阴离子能够增强腔肠素在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光。
4. 高通量筛选。
5. 监测活细胞内钙离子水平。


产品描述




腔肠素h（Coelenterazineh）是海肾荧光素酶（Rluc）和Gaussia荧光素酶（Gluc）等多种荧光素酶的作用底物，其发光强度比天然腔肠素高10倍以上，适用于报告基因分析。也是水母发光蛋白的辅助因子，可用于检测活细胞中钙离子浓度。
本品是即用型腔肠素h，特别设计用于Renilla luciferase体内活体成像研究。最小化产品成分的变化、冻融次数和严格控制批间差异?保结果的高重复性。本品优势：①溶于丙二醇和柠檬酸，稳定性高，即开即用，无需考虑粉末配制液体过程造成的稳定性差异；②批次间严格控制差异，特别设计用于体内研究；③即用型产品，减少时间和精力；4）IVIS成像系统验证，保证成像质量。


运输和保存方法




冰袋运输。-20℃避光保存。长期保存条件：-80℃避光保存。有效期一年。






产品组分




    

        

            

            
编号
            
            

            
名称
            
            

            
规格
            
            

            
浓度
            
            

            
数量
            
        
        

            

            
40907-A
            
            

            
即用型腔肠素h
            
            

            
1.2 mL/vial
            
            

            
150 μg/mL
            
            

            
10 vials
            
        
    


 
使用方法




1.准备工作
实验前，取出-20℃或更低温度保存的即用型腔肠素h，37℃水浴锅解冻，稍微漩涡混匀后即可使用。
【注】：避免反复冻融，务必根据实际用量取出所需剂量产品。
2.注射方法及剂量
①静脉注射：推荐剂量15 μg/mouse (100 μl/mouse）。使用1 ml注射器直接从瓶内吸取溶液后，用25 gauge或更高的针头注射入小鼠体内。尽快成像检测以获得峰值信号。
【注】：静脉给药后小鼠可能经历短时间痉挛，但能够快速恢复。
②腹腔注射：推荐剂量是30 μg/mouse (200 μl/mouse)。方法同上。


应用实例




 
 
Figure 1 Coelenterazine h has been optimized for in vivo use with IVIS imaging systems. (A)5pmol BRET Qdot 700 was injected intravenously in a nu/nu mouse. 10 minutes post BRET Qdot injection 15μg/mouse Coelenterazine h was injected intravenously. Chart shows peak signal was observed right after injection at ~22 seconds followed by rapid clearance. Images were taken with IVIS kinectic. (B)1, 2 and 4pmol BRET Qdot 655 were injected subcutaneously in a nu/nu mouse. 10 minutes post BRET Qdot injection 10μg/mouse Coelenterazine h was injected intraperitoneally. Chart shows that peak signal was reached around 27 minutes post i.p. injection of Coelenterazine h.


注意事项




1）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

2）本产品仅作科研用途！