杭州环特生物科技股份有限公司

服用一段时间供试品后，将斑马鱼固定、脱水、包埋、切片，进行H&E染色，我们观察斑马鱼各组织脏器结构病理变化。

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孕妇用化妆品的潜在安全性区别于常规化妆品主要体现在对化妆品的生殖毒性方面，利用斑马鱼技术可以对孕妇用化妆品进行安全性评价，主要参照GBT 35517-2017评价方法。

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我们检测过敏有两种方法。1. 类胰蛋白酶的含量：用酶标仪检测类胰蛋白酶的含量。2. 肥大细胞数量：制作病理切片，经过过碘酸雪夫染色，肥大细胞呈蓝色，肥大细胞释放的组胺和白三烯等物质呈红色。

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骨密度几乎由骨骼中钙含量来反映，应用特异性地结合钙的荧光染料染色（呈绿色），用其荧光强度可反映骨密度。斑马鱼骨骼染色后经荧光显微镜采集到的荧光强度能够客观反映骨密度。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，免疫调节剂组巨噬细胞数量与正常对照组相似，并未出现模型对照组免疫力低下的情况。2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。

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我们评价斑马鱼眼毒性有4个指标：1.眼睛大小；2.眼部细胞凋亡；3.眼部血管面积；4.眼部病理切片。

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巨噬细胞是能吞噬和杀灭胞内寄生虫、细菌、肿瘤细胞、以及自身衰老和死亡的细胞，并能发挥机体的免疫防御、免疫自稳、免疫监视功能的抗原递呈细胞。

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经过各组斑马鱼的对比实验，摄入供试品组的斑马鱼体内VTG有下降趋势，子一代斑马鱼有致畸性，性腺病理切片有不同程度的异常，与性腺发育和繁殖行为相关基因的上调。本实验证实了该供试品对斑马鱼有生殖毒性。

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【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，免疫调节剂组中性粒细胞数量与正常对照组相似，并未出现模型对照组免疫力低下的情况。2.本实验证实了盐酸小檗胺具有增强免疫力的功效。

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1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用/注射供试品组的组织器官产生明显的毒性表型，与正常对照组存在明显的差别。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有胚胎毒性。

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